課程名稱 |
病毒基因工程學特論 Special Topics in Viral Genetic Engineering |
開課學期 |
107-2 |
授課對象 |
生物資源暨農學院 植物病理與微生物學研究所 |
授課教師 |
趙裕展 |
課號 |
PPM5052 |
課程識別碼 |
633 U1220 |
班次 |
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學分 |
2.0 |
全/半年 |
半年 |
必/選修 |
選修 |
上課時間 |
星期六3,4(10:20~12:10) |
上課地點 |
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備註 |
總人數上限:8人 |
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課程簡介影片 |
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核心能力關聯 |
核心能力與課程規劃關聯圖 |
課程大綱
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為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
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課程概述 |
本課程包括課程說明及討論課2-3堂,接著皆為實驗課。主要為讓同學親手從事實驗,練習如何用昆蟲桿狀病毒生產基因工程蛋白。昆蟲桿狀病毒對人無害,為目前所知大概是最好的蛋白基因工程工具,可以生產品質極佳的動物及人類疫苗,很有產業價值。此病毒也可為組織工程及哺乳類細胞的基因轉殖工具,幫學術研究機構從事研究,是一個很有價值,對同學們未來的發展很有助益的課程。本課程基本上希望幫忙學生學習,可視需要彈性修改內容,不至於造成過度負擔。 |
課程目標 |
本課程開授之主要目的在教導如何以基因工程的方法操控有用病毒,以生產對人類有益的產品。內容包括講授病毒基因工程的原理與方法,讓同學們能在知識面了解如何操控病毒。本課程更重視實務操作與經驗,提供充分的材料,並全程輔以助理協助,使同學們能掌握整個學習過程以及實際操作進度,而有實際的收穫。本課程將以植物保護之重要病毒,昆蟲桿狀病毒,為主要內容及材料,進行教學及實驗操作。基因工程操控桿狀病毒可以生產大量且高品質的蛋白質,而為醫、農、工業使用,如製造疫苗、飼料添加物、實驗室蛋白等等,對同學之知識面及將來研究或就業之實務面幫忙甚大。 |
課程要求 |
2 學分 大學及研究所同學選修課程
一、雙向教學:教授主要課程後,學生蒐集資料,並報告如何創新病毒平台系統。
二、在整學期中實際動手做出一個基因工程病毒以生產蛋白。
三、訓練學生在學期末做出一個完整的論文,並上台練習做報告。 |
預期每週課後學習時數 |
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Office Hours |
另約時間 |
指定閱讀 |
桿狀病毒基因工程構築手冊 |
參考書目 |
無 |
評量方式 (僅供參考) |
No. |
項目 |
百分比 |
說明 |
1. |
出缺席狀況 |
20% |
可請假 |
2. |
每項實驗結果 |
20% |
可檢討結果以便以後改進 |
3. |
專題報告 |
20% |
自行蒐集資料,並報告如何創新病毒平台系統 |
4. |
實驗結果報告 |
40% |
紙本+口頭報告 |
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週次 |
日期 |
單元主題 |
第1週 |
2/23 |
桿狀病毒基因工程課程介紹 |
第2週 |
3/02 |
桿狀病毒基因工程課程上課 |
第3週 |
3/09 |
桿狀病毒基因工程課程上課 |
第4週 |
3/16 |
桿狀病毒基因工程課程上課 |
第5週 |
3/23 |
- 質體DNA限制酶切割、DNA片段電泳及回收
- 試測DNA回收量、結合反應、轉型作用
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第6週 |
3/30 |
- 利用 Colony PCR 進行確認
- (預養 3 c.c. 的轉型菌)質體DNA的純化
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第7週 |
4/06 |
實驗準備 |
第8週 |
4/13 |
實驗準備 |
第9週 |
4/20 |
- 以共轉染 (co-transfection) 製作重組病毒
- 觀察預先做好的重組病毒的螢光
- 利用end-point dilution cloning 純化重組病毒
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第10週 |
4/27 |
- 觀察上週共轉染的重組病毒的螢光
- 標記end-point dilution中病毒感染的細胞位置
- 挑出純化之重組病毒於T25 flask中放大
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第11週 |
5/04 |
- 10倍稀釋病毒以測定桿狀病毒的力價
- 測定桿狀病毒的力價 (Q-PCR, one of the 24-well) |
第12週 |
5/11 |
- 使用螢光顯微鏡觀察並記錄結果(TCID50)
- 比較TCID50 和Q-PCR之差異
- 感染細胞生產融合蛋白,準備下星期做SDS-PAGE分析產量
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第13週 |
5/18 |
- 以SDS-PAGE分析產出的蛋白質 |
第14週 |
5/25 |
- 繳交報告 |
第15週 |
6/01 |
- 期末報告,做成幻燈片討論 |
第16週 |
6/08 |
- 期末報告 |
第17週 |
6/15 |
- 期末報告 |